PCR试验是指基因扩增试验,其特点是可以大幅增加微量DNA。它是一种常规的生物学研究和实验方法,广泛应用于各个生物领域,如艾滋病检测、乙肝、禽疫、癌基因检测和诊断、DNA指纹、个体识别、亲子鉴定和法医物证等。中创智领实验室现在正在进行PCR、详细说明施工要求和要点。
一.PCR实验室布局
原则上,PCR实验室是四个独立的工作区域:试剂准备区、样品制备区、扩增区和扩增产品分析区,并有专用过道。每个工作区域应设置缓冲间,工作区和缓冲间应安装连锁装置。不同功能的工作区域应分开,每个工作区域都有明显的标志,不能直接到达。如果间隙连接,应安装物体传输窗口。前两区为扩增前区,后两区为扩增后区,即从:试剂准备区-样品制备区-PCR扩增室-产品分析室,不得反向流动。实验室的气流也应从扩增前区流向扩增增增增后区。㎡一个40W紫外线灯。
二是实验室各区功能及关键设备
1. 试剂准备区:主要制备试剂、分装和主反应混合液。样品制作的试剂盒材料应直接运输到该区域。试剂原料必须储存在该区域,并在该区域制备所需的试剂。该区域的关键设备包括天平、冰箱、离心机、加样器、振荡器等。对于气流压力控制,这个区域没有严格的要求,一般是 10Pa。
2. 样品制备区:主要用于样品的储存、核酸提取、储存和添加到扩增反应管和测量DNA的合成。该区域的关键设备包括冰箱、生物安全柜、离心机、加样器、振荡器等。该区域的压力梯度要求是:与相邻区域相比,为了防止气溶胶污染从相邻区域进入该区域,一般为 10Pa。
3. 扩增区:主要进行DNA扩增。此外,该区域还可以添加已制备的DNA模板(来自样品制备区),并在主反应混合液(来自试剂准备区)中制备反应混合液。该区域的关键设备包括扩增器、冰箱、离心机、加样器等。该区域的压力梯度要求是:相对于相邻区域的负压,一般为-25Pa,防止气溶从该区域漏出。
4. 扩增产品分析区:扩增产品的测量。该区域的关键设备包括酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱。该区域的压力梯度要求是:与相邻区域相比,一般为-25Pa,防止扩增产品从该区域扩散到其他区域。
三. 排气系统和压力控制
每个区域之间应具有单个实验流程、物流、人流和气流,形成单向流程的保护屏障,防止实验室之间的相互影响,避免气溶胶扩散对实验过程造成污染。
PCR实验室对净化没有严格的要求,但为了防止每个实验区交叉感染的概率,应采用全送全排气流组织的方法,严格控制送货比例,以保证一个实验区的压力要求。
四.PCR实验室装修
实验室的围护结构应牢固,密封性能好;所有阴阳角应过弧;墙体内壁光滑,无灰尘,耐腐蚀,易清洗消毒;路面采用PVC卷材或环氧树脂自流坪,材料应满足无缝、无渗漏、光滑、耐腐蚀的要求。
五.PCR实验室注意事项
1.几个区域的尺寸设置,试剂准备区、扩增区、扩增产品分析区,空间可以相对较小。生物安全柜和低温冰箱应放置在样品制备区,空间应更大。
试剂准备区,样品制备区设置紧急洗眼器,确保操作人员的安全。
青岛中创智领实验室系统工程有限公司位于美丽的海滨城市——帆船之都青岛。公司注册资金2028万元,公司经营范围涵盖实验室装修、暖通、家具、环保、洁净室和恒温恒湿室以及相关实验室仪器设备等众多专业领域。
Copyright © 2018-2019 青岛中创智领实验室系统工程有限公司 版权所有鲁ICP备18034296号-1